传统显微镜的挑战
不断增加的培养方法允许癌细胞生长为3D球体。这些细胞球状体模仿实体肿瘤的特性,非常适合模拟与生理相关的癌症发展。复杂的三维结构和体积尺寸是传统光学显微镜的一个挑战。这可以通过基于光板的显微镜来克服,它允许在合理的时间内跟踪大样本的亚细胞变化。
放大你的结果
用Leica SP8数字灯表的蜂窝球体调查(DLS)显微镜揭示了标准培养皿中细胞和分子过程的有意义的结果,非常适合癌症研究。
带多位置实验的球面成像工作流程
188金宝搏的网址徕卡微系统'数字LightSheet模块(DLS)可以集成在任何倒置的联合徕卡的垂直轴上TCSSP8显微镜。
- 在标准培养皿中易于样品制备节省时间。
- 在一个实验中的多个球状体的成像允许高效的长期观察。
3D细胞生物学,球状体,有机体
3D细胞生物学工作流 - 步骤
第1步:准备
样品是用标准玻璃底培养皿制备的。不需要特殊的设备,例如毛细血管。您可以通过直接在一小体积的水凝胶中生长几个球形或者,或者通过将几滴水凝胶放置在培养皿内并将已经开发的球体转移到它们中,在一个实验设置中准备几个试样。
步骤2:安装
培养皿颠倒过来,使球体下沉到一个确保最佳观测的位置。下一步,水凝胶在37°C凝固,产生一种凝胶,将球状体固定在原位。最后,再次将培养皿翻直,并充满培养基。
第4步:数据处理
通过将它们从临时内存持续传输到硬盘或服务器解决方案,保存您的图像,因为您通过将它们从临时内存传输到硬盘或服务器解决方案(例如,Acquifer Hive)。
第5步:可视化
一旦图像获得,您可以立即可视化您的结果与3D可视化工具的徕卡拉斯x 3D软件。在某个时刻在3D上查看你的球体,或者检查所获取的数据的子培养,以可视化标有不同标记标记的单个单元分区。
第6步:分析
比较来自不同遗传背景或经历不同处理的球状体的行为是一项重大挑战。当您需要收集定量信息时,数据分析是一个必不可少的工具,例如关于健康和受损组织的信息。一个强大的2D和3D分析工具是徕卡的一部分拉斯X软件。
第7步:分享
通过使用tif或jpeg等通用图像格式,与您的同事、其他机构或全球任何媒体分享您的结果。电影可以很容易地导出为mp4视频,您的量化结果可以在Excel报表中进一步评估。
其他研究领域:神经科学
在神经科学中,在其他进展中,已经开发了Zika病毒的有机胶模型来研究大脑。这些有机体是发育,疾病发病机制和药物筛选的理想体外模型。
进一步阅读3D生物学
Ishiguro等人,癌症科学,2017年:肿瘤衍生的球状:与癌症干细胞和临床应用的相关性。
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5378268/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5378268/半球和梅尔,Biotechnol J,2017:将3D肿瘤模型带到个性化医学的临床预测价值。
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28098436
Sato和Clevers,细胞,2015:快照:从干细胞中培养类器官
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26091044