用徕卡TCS SP2光漂白后的荧光恢复

在已描述的所有光漂白实验中，光漂白后的荧光恢复(收紧)是最流行的。它利用短激光脉冲照射活样本中的荧光团来降解它，从而消除荧光，然后对样本进行时间分辨的图像记录。如果荧光团(或其所谓的移动部分，见下文)能够自由地扩散通过样品，可以观察到荧光的恢复。光漂白实验可以用现代激光扫描显微镜进行，激光在高强度下用于漂白，在低强度下用于记录图像。由徕卡微系统提供的LCS软件包含一个188金宝搏的网址收紧应用向导，指导用户使用徕卡TCS通过a收紧实验。

本申请书内容:

• 定性与定量收紧
• 准备

  • 建立实验条件
  • 最初的实验

• 收紧实验

  • 光漂白:溶液中荧光标记的聚合物
  • 收紧活细胞中的核蛋白

• 数据处理

  • 背景减法
  • 修正了由于光漂白而造成的荧光损失
  • 归一化

• 估计的参数

  • 流动分数的计算
  • 计算t_1／2
  • 扩散系数D的估计
  • 建模

• 演示实验评价

  • FD 464
  • H1 -绿色荧光蛋白

• 最后的评论