从心脏球体中培养心脏起搏器细胞

清晰、快速地成像三维细胞培养

这里显示的椭球是原始广角图像数据的最大投影(左)和迅雷图像后即时计算清除(右)。这些图像来自大约60µm的Z层。不同的染色(α肌动蛋白和波形蛋白)被用来帮助识别不同的细胞类型。图片由Sandra Grijalva, Wallace H. Coulter生物医学工程系,佐治亚理工学院和埃默里大学,美国亚特兰大提供。188bet怎么注册Developing_Heart_Pacemaker_Cells_From_Cardiac_Spheroids_teaser.jpg

在过去的十年中,与传统的2D培养系统相比,3D细胞培养已经成为一种更现实的模型。细胞可以发育成微型3D物体,也就是所谓的球体,它在功能和发育上比2D细胞培养更像器官。这一事实使它们成为体外疾病研究的伟大工具。此外,可以想象,利用3D细胞培养生产“备件”,最终可以植入一个活的有机体,以治疗疾病。

介绍

数以百万计的人都有心律不齐的经历。心律失常通常由年龄、先天性缺陷或心脏病引起,传统医学上通过植入人工起搏器来调节心律失常,从而影响患者的生活质量。188bet怎么注册

对于儿童来说,这些电子设备太大了,因此有一个研究实验室正在努力开发一种“无硬件”的解决方案,即从普通的心脏肌肉生产功能性起搏器细胞[1].这项实验室研究需要使用3D细胞培养和球状体,这给用显微镜进行高分辨率观察带来了一些挑战[2]

图1:佐治亚理工学院和埃默里大学生物医学工程系的研究实验室的策略是使用3D细胞培养和球体从普通心肌中培养功能性起搏器细胞188bet怎么注册[1]

挑战

宽视野显微镜在速度、生存能力和成本方面具有优势,使用传统光学显微镜方法对多达四个荧光通道的大球体成像,会产生严重的失焦雾,限制了记录标本生长和功能的能力。

方法

球形细胞来源于新生大鼠心室肌细胞(NRVM),在特殊的平板上生长。然后,用单层细胞培养覆盖球形细胞[1].用α -肌动蛋白和波形蛋白抗体染色。得到约60µm的z -堆积THUNDER成像仪活细胞它还应用了光数字技术即时计算清理(ICC)[3].为了比较,生成了原始宽视场和THUNDER ICC图像的最大投影。

结果

与经典的宽视场图像相比,使用计算清除技术处理的THUNDER图像显示了更多的球体细节。此外,如图2所示的图像使单层细胞和椭球细胞之间的动态更多的探索成为可能。

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