试验用保拉法进行 试验用保拉法进行

评论PAULA peut-il aider à合理化我的测试的工作通量?

伤口的检验,可以是évoqué可以是伤口的检验(划痕试验或剂量试验)或者迁移,可以是évaluer和细胞迁移的测量器,细胞种群中唯一的细胞的变化。细胞的迁移是étroitement contrôlée pendant les procsus ontogénétiques和elle peut parfois devenir incontrôlable, p.e.在développement和癌症进展的阶段。

重要的问题à关于移民的问题:

  • 在médicament spécifique上对细胞的迁移有什么影响?
  • À在某些条件下迁移的细胞是什么?

L 'experience de cicatrisation

La procédure élémentaire pour un test de cicatristion est très simple。danans une monocouche cellulaire confluente à 100%, unespace人造细胞除外细胞est créé et la capacité des cellules à combler cet est surveillée。

De nombreux paramètres doivent être pris en compte et normalisés afin d 'obtenir des résultats fiables和可复制品。Les paragraph suivants traits de某些方面généraux du contrôle des cellules et décrivent comment PAULA peut contributor à simplifier Les tâches du flux de travail。

Méthodes de contrast appropriées

Les monocches cellulaires sont difficulty iles à détecter, voire«invisibles»,avec un microscope à fond clair standard. jpg (81.86 kb,下载)相的对比,细胞的结构是évidence和détection。更重要的是,安装显微镜à对比相peut s 'avérer注意使用和长时间使用,特别是对初学者。荧光可以généralement de contrôler影响迁移。正确的,这个méthode不方便来méthode的对比标准,车的光blanchiment和phototoxicité peuvent altérer considérablement迁移。

  • 还有,你们没有对比相没有对准,没有réglage最后。
  • 相的对比是有效的。
  • 荧光对比(émission rouge et verte, p.e. cellules marquées GFP et dsRed) peut être ajouté si besoin。

在合流的沙发上测试伤口愈合à 100%。

好的时刻是至关重要的。在病人的身体上,伤口的测试如下:effectués avec une cellulaire confluente à 100%。保持小细胞的欢度,这是我们注意的一个汇合点,百分之百可以诱导détachements小细胞和même抑制小细胞。在conséquent中,这是很重要的,我们要开始测试,我们要做的是expérience réussie和résultats结论。

  • 请您告诉我们细胞的位置,注意汇合点souhaité。
  • 你们可以在细胞培养实验室和vérifier细胞manuelelement。
  • 您有时间给我们做试验。

最理想的条件是原始条件。

对剧本的检验:réalisés en ourant à une analyse«de l’绝境»。细胞文件être retirées孵育箱和细胞文件être contrôlées manuellement pour déterminer空间是complètement refermé。这个方法要求用户considérable,而不是précise。在显微镜下保存细胞文件的可能是également在显微镜下保存细胞文件的可能是équipée在室内气候的可能是équipée。原则上,这个选择是有效的,但是température和CO2的波动不能排除être complètement。那么我们不能把这些细胞放出来là où那么我们就有机会把这些细胞放出来了?这是-à-dire,这是一个培养箱,有条件的环境,还有可能的最优培养箱。

  • 你们可以在普通培养室的培养箱où我们的小室conservées在最佳条件下。
  • 这个点是稳定的挂件- aucun réajustement n 'est nécessaire。
  • PAULA réalise des enregistments en temps réel和计算instantanément le taux de migration actuel和le por百分比de fermeture,如果le temps estimé pour一个fermeture à 50%。
  • L ' état de la cellule et les résultats peuvent être surveillés en permanence, où你可以看。

空间的尾巴是不重要的。

在这张纸上,在这张纸上,小房间的自由空间是créé manuellement à一个移液管的尖。La taille des stries dépend larement de La pression appliquée à La surface de La monocouche。更重要的是,为résultats的可复制性,努力保持不变。

  • Déterminez la largeur exact de l ' space de cellules à l 'aide du système de measure intégré de PAULA。
  • 在différentes文件中添加了可比较的空间。
  • 宝拉方便également aux空间无单元induits par插入,par例如de ibidi。

Autres paramètres important pour la reproductibilité

除了空间的尾部和环境条件之外,还有可能影响伤口试验的因素。举个例子,paramètres技术告诉我们paramètres成像,获取,以及étalonnage du système,因为我们知道l échantillon的条件是细胞通过的数量。PAULA contrôle是paramètres的两种类型。

  • 我们应该登记细胞通道的数目。在这里façon,当你和états相似的牢房比较时,你就可以保存à。
  • Mémorisez tous vos réglages personnel pour un échantillon特别地,包括réglage final des paramètres,而不是amment l’éclairage。
  • Un étalonnage supplémentaire du système n 'est pas nécessaire。

我把它放在一个方便的地方

如果我们的测试是简单和容易的à répéter更多的fois,那么résultats更多的易感者和être可复制性。您可以这样说:我们所做的测试是简单而直观的。Trois étapes seuement sont nécessaires pour un test de cicatrisation réussi。

  • Definissez的样本
  • Définissez温度区间
  • Définissez la zone d 'intérêt

résultats的重要性

这是最后的内容。

  • 宝拉我们有一个représentation图表,描述空间和迁移的值。
  • 在时间里的点utilisés为空间和行为的计算être définis仲裁,在空间和行为的限制下的小房间的影响éliminés。
  • Le temps nécessaire pour une fermeture à 50%和à 100% est d'abord estimé, puis values réelles sont calculées si elles sont atteintes。
  • Toutes les données peuvent être affichées dans une list et exportées dans des fichiers Excel。
Vidéo d 'un test de cicatrisation composé de cellules HeLa。
把它放在普通细胞培养箱où把细胞送到conservées把它放在最佳条件下。
协议如下:simplifiée d 'un test de cicatrisation grâce au système d 'imagerie cellulaire PAULA

相关图片

试验用保拉法进行
Cellules HeLa visualisées avec对比相,10x。拉尔夫·雅各布教授授权,Université de Marburg, Allemagne
PAULA分析一个空间créé dans la cellule HeLa, monocouche test de plaaie。
例如,在本课中,我们计算了空间的费和迁移量,并测试了蜂窝结构。